单核细胞树突状细胞培养：

1 、准备新鲜的外周血单个核细胞（ PBMC ）。

2 、将外周血单个核细胞在铺在培养瓶中，用加入 25 mL 免疫细胞无血清培养基货号 BW12002 。

3 、在 37 ℃， 5 ％ CO 2 的潮湿培养箱中孵育 2 ～ 3 小时。

4 、弃掉含非贴壁细胞的培养基。

5 、用生理盐水洗涤贴壁细胞（主要是 CD14 + 单核细胞）三次。

6 、往免疫细胞无血清培养基添加 50 至 100 ng / mL 的重组人 IL-4 和 50 ng / mL 的重组人 GM-CSF 。细胞密度应介于 1~3x10 5 细胞 / mL 之间。研究者可视情况加入灭活的人自体血浆。

7 、在 37 ℃， 5 ％ CO 2 的潮湿培养箱中连续孵育 5 天。培养 3 天左右换液。同时添加 IL-4 和 GM-CSF 。

8 、 6 天之后，细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记（细胞 CD1a ， CD80 ， CD86 ， HLA-DR ）。

9 、向培养基中添加 1 μ g/ mL 的 LPS 或者 50 μ l/mL 的 TNF- α诱导的树突状细胞的成熟。

注：对于贴壁单核细胞也可以被磁珠分离。