计算原则：每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是：1500元。一抗另计（客户可自行提供一抗或由本公司代购，一抗订购时间约为2～3周）

注意事项：一般常用于动物组织的测定。测定Western Blot，需要提取蛋白后进行测定。一般分成：全蛋白、核蛋白、膜蛋白。最常做并且比较好做的是全蛋白，当然主要还是看客户的目的蛋白存在的部位，如果简单的全蛋白提取不行，需要提取核蛋白或者是膜蛋白。考虑到客户所需的目的蛋白差异太大，并且特殊性、也不够清楚，一般建议客户自备抗体，做预实验确定是否有阳性条带，如果有则继续进行正式实验。

预实验：挑取个别组的样本（1～2个），进行蛋白提取，然后进行检测。如有阳性条带，则通知客户可进行正式实验；如没有，一般需要进行再次预实验，如果还是没有，则通知客户无法检测。

样本材料：新鲜或冷冻组织样本不少于50mg，已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/uL,新鲜或冷冻细胞样本不少于106个

样本信息：

① 样本形式、种属、部位（如大鼠 肝脏组织）

② 目的蛋白（需要具体存在的部位，如果是膜蛋白需注明跨膜结构和数量）

③ 目的蛋白预计分子量（以20～170KD为佳，过大或者过小，都相对不易跑出阳性条带）

④ 提供所带抗体的详细信息（货号、品名、包装、厂家）

实验方法：

① 蛋白提取：根据需要测定的目的蛋白主要来源（胞浆、胞核或者全蛋白），区分组织提取或者细胞提取，选择相应的试剂盒。

② 蛋白定量：采用考马斯亮蓝Bradford法、BCA法测定出所提取的蛋白含量。

③ 蛋白变性：5×电泳上样缓冲液，煮沸5-10分钟。

④ 凝胶电泳：垂直电泳分离出目的蛋白条带。

⑤ 转膜：将SDS丙烯酰胺中的蛋白通过水平电泳的方式转移到PVDF膜或NC膜上。

⑥ 免疫反应：目的蛋白分别与相应的一抗、二抗结合。

⑦ 显色反应：通过化学发光法将蛋白条带显影至胶片上